前言

最近小編注意到，有一個號稱能讓“微生物飛起來”的新型鑒定技術——MALDI-TOF技術，在行業(yè)內(nèi)名聲大噪。那么，“這究竟是一個什么樣的技術呢？”下面就來跟著小編，一起揭開它神秘的面紗！

一、微生物鑒定方法體系

微生物鑒定方法多種多樣。如最常使用的形態(tài)觀察、?鏡檢、?重要的生化反應，還有準確度較高的基因鑒定法。

那么今天小編要介紹的MALDI-TOF方法，是利用對核糖體蛋白檢測及與標準圖庫比對的一種質(zhì)譜方法。

二、MALDI-TOF的原理

MALDI-TOF，全稱基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時間質(zhì)譜（MALDI-TOF-MS）。

該方法檢驗原理是：

微生物中分子量在2000-20000Da范圍內(nèi)的核糖體蛋白質(zhì)，其表達基本不受培養(yǎng)基、培養(yǎng)條件、滅活方式以及生長周期等的影響，屬于保守表達的蛋白質(zhì)，不同種的微生物（甚至亞種）其保守蛋白會有差異，因此每種微生物有其獨特的蛋白質(zhì)指紋圖譜（PMF）；通過MALDI-TOF測得的微生物蛋白質(zhì)指紋圖譜，再與標準庫里的指紋圖譜進行匹配、對比，從而完成對微生物快速準確的鑒定。

圖譜形成、比對及鑒定結(jié)果

三、操作流程

1、取純化后的新鮮培養(yǎng)物，直接涂靶或進行提取后涂靶；2、樣品點靶后，與基質(zhì)混合晾干；3、將靶板進艙，確認真空度均正常和參數(shù)設置均準確后，方可開始采譜；4、獲得樣品蛋白質(zhì)圖譜后，系統(tǒng)將自動與標準庫里的指紋圖譜進行匹配、對比；5、生成最后的結(jié)果與報告。

四、MALDI-TOF的優(yōu)點

這項“如此高大上”的技術，具體有什么優(yōu)點呢？

五、MALDI-TOF的其他應用

除了微生物鑒定外，MALDI-TOF技術還可應用于多種領域，范圍極廣：

1、可疑菌溯源性分析：在檢測出未知菌時，可自建菌庫，保留菌株圖譜信息，有助日后可疑菌的溯源分析。

2、腫瘤篩查中的運用：利用弱陽離子磁珠聯(lián)合MALDI-TOF-MS分析腫瘤患者和健康對照血清蛋白質(zhì)表達譜，鑒定差異表達蛋白，建立疾病診斷模型，探索該疾病的發(fā)病機制。

3、細菌耐藥性分析：MALDI-TOF MS檢測細菌耐藥性的方法主要分為 3 類:?檢測耐藥菌株的特征性質(zhì)譜峰、細菌酶活性作用下抗菌藥物的改變和抗菌藥物存在下細菌生長情況。

結(jié)語

傳統(tǒng)的微生物鑒定技術復雜、繁瑣，耗時、耗力，對技術人員的專業(yè)水平要求較高，而使用飛行質(zhì)譜鑒定技術相對簡便快速結(jié)果準確。相信在不久的將來，這項技術會得到越來越多的關注，應用也越來越廣。