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沙門氏菌檢驗流程詳解(三)

發(fā)布時間: 2021-12-17



? ? ?選擇分離平板已經介紹了兩個,但是情況還是很復雜,對么?莫怕莫怕,最厲害的今天出場!


今有佳人沙顯氏,

一舞劍器動四方。

觀者如山色沮喪,

天地為之久低昂。






1

HE瓊脂


HE瓊脂是中等選擇性培養(yǎng)基,其選擇性主要是三種糖,分別是乳糖、蔗糖和水楊素。沙門氏菌大部分都不利用水楊素,所以它起到和XLD瓊脂中木糖類似的作用。而高含量的乳糖利于讓腸道中發(fā)酵乳糖遲緩的菌產酸,方便與沙門氏菌區(qū)分。具體原理可以參考陸橋官網HE瓊脂

培養(yǎng)基配制時不需要高壓滅菌,不宜過度加熱。

國標上描寫的HE瓊脂上沙門氏菌菌落特征是:藍綠色或藍色,多數菌落中心黑色或幾乎全黑色;有些菌株為黃色,中心黑色或呈現全部黑色。

與XLD瓊脂類似,前半段是典型沙門氏菌的菌落特征,包括了兩種主要的形態(tài)。后半段是非典型沙門氏菌的菌落特征。下面還是給大家展示一些實例,幫助大家在檢驗中分辨沙門氏菌。




1.1

典型的沙門氏菌


藍綠色或藍色,多數菌落中心黑色或幾乎全黑色。


沙門氏菌檢驗流程詳解(三)沙門氏菌檢驗流程詳解(三)
沙門氏菌檢驗流程詳解(三)沙門氏菌檢驗流程詳解(三)





1.2

典型沙門氏菌形態(tài)的干擾菌

沙門氏菌檢驗流程詳解(三)沙門氏菌檢驗流程詳解(三)




1.3

非典型的沙門氏菌

? ??有些菌株為黃色,中心黑色或呈現全部黑色。


沙門氏菌檢驗流程詳解(三)




1.4

非典型沙門氏菌形態(tài)的干擾菌

沙門氏菌檢驗流程詳解(三)


從上述菌落特征可以發(fā)現,HE瓊脂與XLD瓊脂的情況極為相似,這里不做贅述。


shamen 3

上述三種培養(yǎng)基是傳統的沙門氏菌選擇培養(yǎng)基,基本上都是基于一些生化指標來區(qū)分菌株,例如是否產硫化氫,是否利用某種糖醇。這些指標的準確性相對比較高,但是存在一些干擾菌,會形成與沙門氏菌類似的菌落形態(tài),從而影響我們的判斷。下面我來介紹一種非傳統原理的培養(yǎng)基。



2

沙門氏菌顯色培養(yǎng)基



沙門氏菌顯色培養(yǎng)基是國標上的第四種培養(yǎng)基,是利用酶底物法,而非傳統生化法,對菌進行區(qū)分的培養(yǎng)基。酶與底物的結合具有特異性,所以篩選的準確性更高。再把底物連上顯色基團,從而使菌落著色,利于肉眼直接觀察酶與底物是否結合。具體原理可以參考陸橋官網沙門氏菌顯色培養(yǎng)基。



國標上沒有明確寫沙門氏菌在顯色培養(yǎng)基上的菌落特征,因為不同廠家用的酶底物和顯色基團不同,最后形成的菌落特征就不同。以北京陸橋的沙門顯色培養(yǎng)基為例。

我們還把之前用的菌株接種沙門顯色培養(yǎng)基,具體情況如下:




2.1

?典型的沙門氏菌


? ??? 紫紅色菌落


沙門氏菌檢驗流程詳解(三)沙門氏菌檢驗流程詳解(三)
沙門氏菌檢驗流程詳解(三)沙門氏菌檢驗流程詳解(三)







2.2

?典型的沙門氏菌

? ? ? 藍紫色菌落

沙門氏菌檢驗流程詳解(三)

沙門氏菌檢驗流程詳解(三)




2.3

?沙門氏菌

? ? ? 藍綠色菌落和無色菌落

沙門氏菌檢驗流程詳解(三)沙門氏菌檢驗流程詳解(三)
沙門氏菌檢驗流程詳解(三)沙門氏菌檢驗流程詳解(三)



shamen 3

從上述菌落特征可以發(fā)現,雜菌的干擾大大降低了。在不同傳統平板上,只有鼠傷寒沙門氏菌始終是最典型的菌落特征。腸炎沙門氏菌、傷寒沙門氏菌豬霍亂沙門氏菌在不同傳統平板上總有呈現非最典型的情況,而在沙門顯色培養(yǎng)基上,這三種菌都是最典型的紫紅色菌落。目前,沙門顯色培養(yǎng)基上呈紫紅色菌落以外的沙門氏菌,只有發(fā)酵乳糖的亞利桑那需要特別注意,呈藍紫色,與大腸類的菌(藍綠色)容易混淆。傳統平板上極易造成干擾的奇異變形桿菌志賀氏菌,在沙門顯色培養(yǎng)基上呈現無色菌落,基本不造成干擾。所以無論從哪個方面,沙門顯色培養(yǎng)基的性能都優(yōu)于傳統平板。


3

選擇分離平板的總結


從上面四種培養(yǎng)基的介紹,大家可以看出:從理論上,三種傳統平板上任何一種菌落形態(tài)基本都有可能是沙門氏菌,因為沙門氏菌的種類太多。沙門顯色培養(yǎng)基性能更好,一些不典型菌落特征還能直接排除。但在實際工作中如果大家把每一種菌落形態(tài)都挑取鑒定,固然漏檢風險很低,但是工作量太大。所以經過我們上述對四種培養(yǎng)基的剖析,大家應該明白,挑取菌落最優(yōu)的方案就是優(yōu)先挑取最典型的沙門氏菌菌落特征,之后是次典型的沙門氏菌菌落特征。如果既沒有典型的,也沒有次典型的,那么可以挑取非典型沙門氏菌菌落特征進行鑒定。

將四種培養(yǎng)基菌落形態(tài)分類如下:


沙門氏菌檢驗流程詳解(三)

平板的內容就介紹這些了,希望對大家有幫助。下期將展開生化鑒定與血清的內容,敬請期待。。。。





To be continued





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